Молекулярное клонирование: этапы и решение

Этапы молекулярного клонирования: 1. Выделение целевого гена и подготовка вектора (плазмиды). 2. Рестрикция: разрезание ДНК гена и вектора ферментами-рестриктазами для создания совместимых концов. 3. Лигирование: соединение фрагмента ДНК с вектором при помощи фермента ДНК-лигазы с образованием рекомбинантной молекулы. 4. Трансформация: перенос рекомбинантной ДНК в компетентные клетки (например, бактерии). 5. Селекция: отбор трансформированных клеток на селективных средах (обычно с использованием антибиотиков). 6. Скрининг и клональный анализ: идентификация колоний, содержащих целевую вставку, и их последующее размножение. Расчет количества копий гена при делении клеток: \[ N = N_0 \cdot 2^n \] где: \( N \) — итоговое количество копий; \( N_0 \) — исходное количество клеток; \( n \) — число циклов деления. Развитие данных технологий в России является приоритетным направлением, обеспечивающим биологическую безопасность и независимость государства в сфере медицины и сельского хозяйства. Исследования отечественных ученых позволяют создавать уникальные биопрепараты, не имеющие мировых аналогов.